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TECHNICAL ARTICLES康寧重組人層粘連蛋白rLaminin-521是由α5、β2和γ1鏈組成的異源三聚體,由哺乳動物細胞培養系統表達。rLaminin-521可配合無血清、無動物源培養基,支持人多能干細胞(hPSC)的長期自我更新,包括胚胎干細胞(hESC)和誘導多能干細胞(iPSC)。rLaminin-521培養hPSC 無需添加ROCK 抑制劑,即可進行PSC的單細胞擴增 ,從而降低了hPSC培養的難度,實現有效擴大培養。
主要特點:
重組蛋白,成分明確,安全
包被過程簡單
提供基于100μg/管的多種包裝規格,方便操作
與多種hPSC培養基和消化試劑兼容,適用范圍廣泛
支持未分化的hPSC擴增
可用于無異源,化學限定培養條件,方便進行臨床轉化
人多能干細胞(hPSC)培養
hPSC,包括人類胚胎干細胞和人類誘導多能干細胞,具有無限的自我更新能力和分化潛能。理論上這些細胞可以分化為人體各種細胞類型,從而成為再生醫學的細胞和組織的來源。hPSC衍生的細胞也可以用作藥物篩選的模型。常規的無飼養層hPSC培養使用團塊方式進行傳代,因為單細胞培養需要在培養基中額外添加ROCK抑制劑。使用這些化學物質的長期影響尚不清楚。團塊傳代方法費時費力,不便于擴大培養規模。
形態
在rLaminin-521(人)上的無異源培養基中培養的hESC表現出具有高核質比的特征集落形態。
標志物表達
通過免疫細胞化學染色檢測未分化hPSC的標志物,成像分析顯示了Oct-4在細胞內的表達(綠色)。同時使用DAPI對細胞核進行了染色(藍色)。
三譜系分化
在無異源培養基中培養10代,hESC分化為擬胚體(EB)并通過定量RT PCR檢測EB中的譜系特異性標志物來評估hESC的多能性。EBs表達3個譜系的標志物,表明細胞在多次傳代后保持多能性。
核型分析
在無異源培養基中rLaminin-521上培養的hESC保持正常的核型。在細胞擴增過程中進行了多次核型分析。
在rLamin-521(人)上評估的hPSC細胞系、培養基和解離試劑:
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